Fatal pulmonary parafilaroidiasis in a free-ranging subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) coinfected with two gammaherpesviruses and Sarcocystis sp / Parafilaroidose pulmonar fatal em um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) de vida livre coinfectado com dois gammaherpesvírus e Sarcocystis sp

Abstract A juvenile subantarctic fur seal (Arctocephalus tropicalis) found dead in Santa Catarina state, southern Brazil, presented with disseminated verminous pneumonia due to Parafilaroides sp. A concomitant infection with two different gammaherpesviruses was identified by PCR in different tissues; one of them possibly a novel species (tentatively named Otariid herpesvirus 7). Sarcocystis sp. DNA was identified molecularly in skeletal muscle samples with intrasarcoplasmic bradyzoites and no apparent tissue response. All analyzed samples (mandibular, laryngeal, tracheal, and mesenteric lymph nodes, and lung) were PCR-negative for Brucella spp. The most likely cause of death was severe pulmonary parafilaroidiasis. The pathogenic role of the gammaherpesviruses in several of the tissues was not evident. This study describes the pathogenicity of Parafilaroides sp. in a subantarctic fur seal, widens the host range of herpesvirus in pinnipeds, and reports the first molecular identification of Sarcocystis sp. in this species.

Resumo Um lobo-marinho-subantártico (Arctocephalus tropicalis) juvenil foi achado morto no Estado de Santa Catarina, sul do Brasil, apresentando pneumonia parasitária disseminada por Parafilaroides sp. Infecção concomitante por dois gammaherpesvírus diferentes foi identificada pela PCR em diversos tecidos, um desses herpesvírus possivelmente uma nova espécie (denominada provisoriamente Otariid herpesvirus 7). DNA de Sarcocystis sp. foi identificado molecularmente em amostras de músculo esquelético que apresentavam bradizoítos intra-sarcoplasmáticos sem aparente resposta tecidual. Todas as amostras analisadas (linfonodo mandibular, laríngeo, traqueal e mesentérico, e pulmão) pela PCR para Brucella spp. foram negativas. A causa mais provável da morte do animal foi parafilaroidose pulmonar severa. O papel patogénico dos gammaherpesvírus em vários tecidos não foi evidente. Este estudo descreve a patogenicidade de Parafilaroides sp. em um lobo-marinho-subantártico, amplia a variedade de hospedeiros de herpesvírus em pinípedes e reporta a primeira identificação molecular de Sarcocystis sp. para essa espécie.

Toxoplasma gondii in cetaceans of Brazil: a histopathological and immunohistochemical survey / Toxoplasma gondii em cetáceos do Brasil: estudo histopatológico e imuno-histoquímico

Abstract Toxoplasmosis is a parasitic disease caused by the protozoan Toxoplasma gondii. In cetaceans, T. gondii infection is a significant cause of morbidity and mortality. Despite the worldwide range and broad cetacean host record of T. gondii infection, there is limited information on toxoplasmosis in cetaceans from the Southern hemisphere. We investigated the occurrence of T. gondii by histopathology and immunohistochemistry in tissue samples of 185 animals comprising 20 different cetacean species from Brazil. Three out of 185 (1.6%) animals presented T. gondii-associated lesions: a captive killer whale Orcinus orca, a free-ranging common bottlenose dolphin Tursiops truncatus and a free-ranging Guiana dolphin Sotalia guianensis. The main lesions observed in these animals were necrotizing hepatitis, adrenalitis and lymphadenitis associated with protozoal cysts or extracellular tachyzoites presenting immunolabeling with anti-T. gondii antibodies. This study widens the spectrum of species and the geographic range of this agent in Brazil, and provides the first reports of T. gondii infection in a captive killer whale and in a free-ranging common bottlenose dolphin in South America.

Resumo Toxoplasmose é uma doença parasitária causada pelo protozoário Toxoplasma gondii. A infecção por T. gondii é uma causa significativa de morbidade e mortalidade, nos cetáceos. Apesar da abrangência mundial e amplo registro de espécies de cetáceos infectadas por T. gondii, informações sobre toxoplasmose em cetáceos do hemisfério sul são limitadas. Neste estudo pesquisou-se por meio de histopatologia e imuno-histoquímica a ocorrência de T. gondii em amostras de tecido de 185 animais, compreendendo 20 diferentes espécies de cetáceos que ocorrem no Brasil. Três dos 185 (1,6%) animais apresentaram lesões associadas a T. gondii: uma orca Orcinus orca mantida em cativeiro, um golfinho-nariz-de-garrafa Tursiops truncatus e um boto-cinza Sotalia guianensis de vida livre. As principais lesões observadas nesses animais foram hepatite, adrenalite e linfadenite necrotizantes associadas a cistos protozoários ou taquizoítos extracelulares, marcados com anticorpos anti-T. gondii. O presente estudo amplia o espectro de espécies susceptíveis a esse agente e o seu alcance geográfico no Brasil, fornecendo o primeiro relato da infecção por T. gondii em uma orca mantida em cativeiro e em um golfinho-nariz-de-garrafa de vida livre na América do Sul.

Comparative morphometric evaluation of hepatic hemosiderosis in wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) infected with different Plasmodium spp. subgenera / Avaliação morfométrica comparativa da hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) de vida livre infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp

Abstract Avian malaria is one of the most important diseases of captive penguins. We employed morphometric techniques to evaluate hepatic hemosiderosis in rehabilitating wild Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) that were negative (n = 9) or naturally infected by different subgenera of Plasmodium spp. (n = 24), according with: Plasmodium subgenera (Haemamoeba, Huffia, Other lineages, and Unidentified lineages), severity of Plasmodium histopathological lesions, and concurrent diseases, age class (juvenile or adult plumage), sex (male, female or not determined), body score (emaciated, thin, good, excellent, not available), molt, presence or absence of oil contamination upon admission, iron supplementation, and rehabilitation center. The percentage of the area occupied by hemosiderin was called 'Index of Hepatic Hemosiderosis (IHH)'. Plasmodium-positive females presented significantly higher IHH values (17.53 ± 12.95%) than males (7.20 ± 4.25%; p = 0.041). We observed higher levels of congestion (p = 0.0182) and pneumonia (p = 0.0250) severity between Unidentified lineages vs. Huffia. We believe that the hepatic hemosiderosis observed in this study was multifactorial, the result of pathological processes caused by malaria, molting, hemoglobin and myoglobin catabolism during migration, anemia, concomitant diseases, and iron supplementation, all possibly potentiated by decreased liver mass. Further studies are needed to clarify the mechanisms of these hypotheses.

Resumo Malária aviária é uma das mais relevantes doenças em pinguins cativos. Foram aplicadas técnicas morfométricas para avaliar a hemossiderose hepática em pinguins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus ) de vida livre em reabilitação negativos (n = 9) e naturalmente infectados por diferentes subgêneros de Plasmodium spp. (n = 24), quanto a: subgênero de Plasmodium (Haemamoeba , Huffia, Outras Linhagens, e Linhagens não identificadas), severidade das lesões histopatológicas causadas por Plasmodium e doenças concomitantes, faixa etária (plumagem juvenil ou adulta), sexo (macho, fêmea, indeterminado), condição corporal (emaciado, magro, bom, excelente, indisponível), muda, presença/ausência de óleo a admissão, suplementação de ferro, e centro de reabilitação. A porcentagem da área ocupada por hemossiderina foi denominada "Índice de Hemossiderose Hepática (IHH)". Fêmeas Plasmodium -positivas apresentaram IHH significativamente mais elevado que machos, respectivamente, 17,53 ± 12,95% e 7,20 ± 4,25% (p = 0,041). Níveis mais elevados de congestão (p = 0,0182) e pneumonia (p = 0,0250) foram observados entre Linhagens não identificadas vs. Huffia. Possivelmente, a hemossiderose hepática observada nesse estudo seja multifatorial, resultado de processos patológicos causados por malária, muda, catabolismo de hemoglobina e mioglobina durante a migração, anemia, doenças concomitantes e suplementação de ferro, potencialmente intensificados por massa hepática reduzida. Estudos complementares são necessários para esclarecer os mecanismos de tais hipóteses.

Comparative leukocyte morphometric analysis between endemic Anurans from Brazil and the invasive species Lithobates catesbeianus / Análise morfométrica comparada entre Anuros endêmicos do Brasil e a espécie invasora Lithobates catesbeianus

Amphibians are potentially reliable and efficient bioindicators. Existing anuran white blood cell morphology studies are limited, with only a few morphometric studies available. We employed morphometric techniques to characterize leukocytes of selected Neotropical anurans from Brazil and compare our findings with the exotic American Bullfrog (Lithobates catesbeianus), genus Ranidae. We compared blood smears of 28 specimens from six different genera (Hyla, Phyllomedusa, Hypsiboas, Scinax, Physalaemus, and Proceratophrys) with samples from L. catesbeianus. Leukocyte average diameter was calculated by an image analysis software. One-way analyses of variance and Bonferroni tests were used on statistical analyses. Lymphocytes, neutrophils, eosinophils, and basophils were significantly smaller than the reference ranges reported for other amphibian genera, including Lithobathes, whereas monocyte diameters did not differ significantly between genera. This is the first study to evaluate leukocyte morphometrics of Brazilian anuran species. Our findings suggest that geographical separation could possibly influence leukocyte morphometry.(AU)

Anfíbios são indicadores ambientais potencialmente confiáveis e eficientes. Estudos referentes à morfologia de leucócitos de anuros são limitados, com poucos estudos morfométricos disponíveis em literatura. O presente estudo empregou técnicas morfométricas para caracterizar leucócitos de anuros Neotropicais brasileiros selecionados e compará-los com a espécie exótica rã-touro (Lithobates catesbeianus), família Ranidae. Esfregaços sanguíneos de 28 espécimes pertencentes a seis gêneros diferentes (Hyla, Phyllomedusa, Hypsiboas, Scinax, Physalaemus e Proceratophrys) foram comparados com amostras de esfregaços de L. catesbeianus. A média do diâmetro dos leucócitos foi calculada por um software de análise de imagens. One-way e teste de Bonferroni foram utilizados para avaliação estatística. Linfócitos, neutrófilos, eosinófilos e basófilos mostraram-se significativamente menores que os valores de referência reportados em outros gêneros de anfíbios, incluindo Lithobathes; por outro lado, a média do diâmetro dos monócitos não demonstrou variação significativa entre os gêneros. Esse é o primeiro estudo de avaliação morfométrica de leucócitos em espécies de anuros brasileiros. Nossos resultados sugerem que a separação geográfica possivelmente influencia a morfometria leucocitária.(AU)

Histological aspects of the mucosa of the spermaceti chamber of a dwarf sperm whale / Aspectos histológicos da mucosa da câmera do espermacete de cachalote-anão

The sound producing apparatus of the dwarf sperm whale (Kogia sima) presents a complex anatomic structure composed of melon, spermaceti, phonic lips, vocal cap, case, papillae, spermaceti chamber and other airspaces, as well as facial muscles involved in sound production. The spermaceti chamber rests on the caudal portion of the premaxilla, with part of its mucosa covered with spherical/oval-shaped structures (approximately 1 to 2 mm in diameter), compatible with vesicles (previously referred to as "papillae"). Macroscopical examination revealed whitish, firm, widely and irregularly distributed vesicular mucosa on the premaxillary portion of the spermaceti chamber of a K. sima specimen stranded on the coast of Santos (southeastern Brazilian coast). Upon microscopic examination, walls of connective tissue with abundant type I collagen forming vesicles with an internal space or cavity filled with a small amount of eosinophilic substance compatible with mucoproteic fluid were observed. The base of such vesicles presented glands within the connective tissue, probably responsible for fluid production. This study describes the histology of the mucosa of the spermaceti chamber of a K. sima specimen and characterizes the glands associated with fluid production.(AU)

O sistema de produção sonora do cachalote-anão (Kogia sima) apresenta uma complexa estrutura anatômica composta por melão, espermacete, lábios fônicos, "vocal cap", "case", papilas, câmara do espermacete e outros espaços aéreos, além de músculos faciais envolvidos na produção sonora. A câmara do espermacete localiza-se na porção caudal da pré-maxila, apresentando parte de sua mucosa recoberta por estruturas esférico-ovaladas de aproximadamente 1 a 2 mm de diâmetro, compatíveis com vesículas (previamente denominadas "papilas"). Ao exame macroscópico de um espécime de K. sima encalhado no litoral de Santos (sudeste da costa brasileira), foi identificada mucosa esbranquiçada e firme ao corte, ampla e irregularmente distribuída na porção pré-maxilar da câmara do espermacete. Ao exame microscópico foram observadas vesículas compostas por abundante tecido conectivo de colágeno tipo I, dando origem a um espaço interno ou cavidade, contendo pequena quantidade de substância eosinófila, compatível com fluido mucoprotêico. Estruturas glandulares foram observadas em tecido conjuntivo na base das vesículas, provavelmente responsáveis pela produção do fluido observado no interior das mesmas. Esse estudo caracteriza histologicamente a mucosa da câmara do espermacete de um espécime de K. sima e as glândulas relacionadas a sua produção secretória.(AU)